抗體作為嬌氣的蛋白質(zhì),它的保存有很多需要注意的地方。如果保存得當(dāng),大多數(shù)抗體的活性均可保持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。
1.一般保存方法
收到抗體后需要進(jìn)行如下步驟操作:
離心并分裝:收到抗體后首先進(jìn)行離心操作使附著在管壁和蓋子上的抗體合并到管底,避免造成損失;離心后進(jìn)行分裝保存,建議分裝量以一次抗體使用量為準(zhǔn)(不低于10ul),抗體反復(fù)凍融會(huì)是蛋白變性,降低與目標(biāo)蛋白的結(jié)合率,同時(shí)也可以盡可能的降低污染的產(chǎn)生;
抗體保存:抗體通常保存溫度為-20℃,但由于抗體存在形式不同,儲(chǔ)存條件會(huì)有區(qū)別,具體儲(chǔ)存方式要以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。?
2.偶聯(lián)抗體的保存
偶聯(lián)抗體包括:酶標(biāo)抗體、熒光標(biāo)記、生物素標(biāo)記,帶有標(biāo)記物的抗體儲(chǔ)存條件會(huì)有不同,但以上偶聯(lián)抗體均要避光保存,光照會(huì)影響偶聯(lián)抗體的活性,需要保存在深色瓶內(nèi),或者包裹上鋁箔。熒光偶聯(lián)抗體特別容易受到光淬滅的影響,因此在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均應(yīng)避光操作。
3.儲(chǔ)存液
甘油:甘油作為常規(guī)的抗凍保護(hù)劑,為減少凍融損失也會(huì)在抗體中添加甘油使抗體終濃度為50%。?
4.抗體濃度
一般建議抗體保存濃度為≥1mg/mL,因?yàn)榈鞍兹绻谳^低濃度下進(jìn)行保存易降解,所以將抗體稀釋至工作液濃度在4°C下保存時(shí),最好不要超過一天時(shí)間。?